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甲硫氨酸,又稱蛋氨酸,化學式為C5H11O2NS,分子量為149.21,有D和L兩種構型。它是人體必需的氨基酸之一,要從外部獲取,并參與蛋白質合成、甲基化反應、抗氧化作用和脂肪代謝等過程。溶于水、稀酸和稀堿,極微溶于95%的乙醇,不溶于乙醚。甲硫氨酸在生物體內通過甲硫氨酸腺苷轉移酶,轉化為甲基供體S-腺苷甲硫氨酸,參與約50種不同甲基受體的甲基化過程。甲硫氨酸主要存在于動物蛋白質中,如肉類、奶制品和蛋類,并廣泛的應用于食品、藥物和化妝品等領域。

檢測甲硫氨酸含量的方法,主要有高效液相色譜(HPLC)法,薄層色譜法,串聯質譜法,酶活法等。這里主要以高效液相色譜(HPLC)法為例,簡單介紹一下流程。
1.樣品處理
研磨樣品,精確稱量,放在100ml的量瓶中,加水70ml,超聲振蕩溶解,放冷。用水稀釋至刻度,搖勻,過濾,精密量取濾液5ml,放在25ml量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻。

2.色譜條件
采用C18的色譜柱,長度250mm,內徑4.6mm,粒徑5um;以0.05mol/L的磷酸二氫鉀-甲醇(85:15)為流動相,流速為1ml/min;紫外檢測器,波長201nm,進樣量10-20ul。
3.標準曲線
稱取甲硫氨酸對照品,加水溶解并定量稀釋成0.1mg/ml。梯度,成倍的稀釋5-7個點,分別注入高效液相色譜儀,記錄色譜圖。橫坐標是標準溶液濃度,縱坐標是對應的色譜峰面積,描點劃線,繪制成標準曲線,得到回歸方程。r2>0.999,這個操作可以在辦公軟件中完成。

4.結果計算
測定樣品中的甲硫氨酸色譜峰,根據標準曲線,計算出樣品中的甲硫氨酸含量。