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隱黃質(zhì)接近于β胡蘿卜素，比β-胡蘿卜素多一個羥基，2個含有4個甲基的20碳分子對尾連接而成，屬聚異戊二烯復合物。它是類胡蘿卜素中葉黃素的一種，屬于天然的植物色素，來源于水果，蔬菜，蛋黃等。化學式為C40H56O，分子量為552.89。具有中和自由基，降低氧化應激損傷的作用。在人體內(nèi)，隱黃質(zhì)可以轉(zhuǎn)變?yōu)榫S生素A，參與調(diào)節(jié)免疫功能和視力。

目前來說，實驗室檢測樣品中的隱黃質(zhì)的含量，主要有高效液相色譜（HPLC）法。

1.樣品處理

樣本要求：固體樣本量≥0.2g，液體≥0.2mL。將樣品中的隱黃質(zhì)提取處理，是需要一套完整的，有效的方法，遵循標準操作流程完成。比如，用0.1%的二叔丁基-4-甲基苯酚（BHT）的乙醇溶液和60%氫氧化鉀水溶液，在50℃的水浴中振蕩皂化。之后，用正己烷-乙醚-環(huán)己烷混合溶劑萃取。經(jīng)過氮吹或旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，用甲醇或乙腈復溶，并用0.45um濾膜過濾，待測。

2.色譜條件

采用常規(guī)的C18色譜柱，250mm長，內(nèi)徑4.6mm，粒徑5um，柱溫30℃；以乙腈-水等度洗脫，或乙腈-甲醇梯度洗脫，流速1ml/min；紫外檢測器，根據(jù)實際情況確定波長，比如450nm；進樣量10-20ul，根據(jù)出峰情況調(diào)整。

3.標準曲線

使用隱黃質(zhì)的標準品，用流動相溶解，梯度稀釋5-7個濃度點。濃度是逐漸變低的，要考慮到稀釋的最后一個點，在檢測器的有效范圍內(nèi)，一般是信噪比的5-10倍的地方。通過有效的色譜條件，依次上機測定各個濃度點的標準品，對出峰情況進行判斷，并確定對應的色譜峰，積分處理?？梢栽谵k公軟件中，使用函數(shù)公式來做標準曲線，得到回歸方程，相關(guān)系數(shù)r2＞0.999。需要方法學驗證的時候，要確定隱黃質(zhì)的良好的線性范圍，檢出限，定量限，加標回收率，重復性RSD等。

4.樣品測定和計算

將處理好的樣品，上機測定對應出對應的色譜峰。對色譜峰面積進行積分，根據(jù)回歸方程，計算出樣品中的隱黃質(zhì)含量。